同时测定呋麻滴鼻液中两组分含量

目的:建立同时测定呋麻滴鼻液中呋喃西林和盐酸麻黄碱的含量的方法。方法:采用紫外分光光度法,检测波长为375nm和257nm。结果:盐酸麻黄碱在0.1~0.5mg·mL-1范围内与吸收度值有良好的线性关系,由此可推出呋麻滴鼻液中盐酸麻黄碱的浓度C麻=1.1387(A257-0.819A375)-0.0001,平均回收率为100.23%,RSD为0.25%。结论:该法简便、灵敏、结果准确,可用于本制剂的含量测定和质量控制。     

甲硝唑环氧乙烷残留量的检测

目的：建立甲硝唑中残留环氧乙烷的测定方法,采用顶空气相色 ＳＥ－３０毛细管柱为色谱柱,ＦＩＤ检测器。用模拟基质进行校正因子的测定,以氯仿为内标甲硝唑中的不环氧乙烷。结果Ｌ：日内精密度为０．３１％,方法平均回收率为１０１．４％,最低检测限为０．０２μｇ／ｇ,结论：简化了测定水不溶物中环氧乙烷的方法,排除由于药物吸水性和顶空体积变化带来的方法误差,方法简便、准确。     

G3PD的修饰蛋白对庆大霉素所致急性肾功能衰竭大鼠的保护作用

目的 :观察 3 磷酸甘油醛脱氢酶 (G3PD)的修饰蛋白 (modifierprotein ,MP)对庆大霉素所致急性肾功能衰竭 (acuterenalfailure ,ARF)大鼠的保护作用。方法 :利用庆大霉素致ARF的动物模型 ,将大鼠随机分成正常对照组、模型组和MP组 ,在实验第 7天和第 14天 ,分别测定各组血清及肾皮质匀浆丙二醛 (malondialdehyde ,MDA)和超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase ,SOD) ,光镜、电镜观察肾组织学改变 ,免疫组化染色标记细胞间粘附分子 1(in tercellularadhesionmolecule 1,ICAM 1) ,同时测定血肌酐 (serumcreatine ,SCr)。结果 :MP组血清及肾皮质匀浆MDA明显下降 ,SOD明显上升 (P<0 .0 1) ;光镜、电镜示MP组肾脏病理比模型组减轻 ,同时SCr下降 (P<0 .0 1) ;免疫组化显示MP组ICAM 1表达下调 ,灰度值升高 ,与模型组相比差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :MP可以缓解氧自由基损伤 ,降低ICAM 1表达 ,减少炎性细胞浸润 ,减轻ARF大鼠肾脏病理状况 ,改善肾功能     

不同分离方法与培养条件下大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖情况比较

目的:应用贴壁分离法和密度梯度离心法以不同培养条件观察纯化过程中对获得的骨髓间充质干细胞的影响,试图寻找获得高质量、高活性的骨髓间充质干细胞的培养条件。方法:实验于2005-09/2006-01在解放军第四军医大学实验动物中心实验部进行。①SPF级雄性Wistar大鼠18只,贴壁分离培养取12只,根据血清和培养基的不同分为4组:进口血清 DMEM组、进口血清 F12-DMEM组、国产血清 DMEM组、国产血清 F12-DMEM组,3只/组。密度梯度离心培养实验取剩余6只,以分离液的不同分为Ficoll分离液组、Percoll分离液组,3只/组。②骨髓取材:各组大鼠断颈处死后,无菌取双下肢,剔除股骨、胫骨周围肌肉组织,剪去骨干的两端,暴露骨髓腔,穿刺两侧骨端取出骨髓。③贴壁分离法:进口血清 DMEM组、进口血清 F12-DMEM组、国产血清 DMEM组、国产血清 F12-DMEM组大鼠分别采用相应的血清和培养基冲洗骨髓,制备单细胞悬液,接种于培养瓶中,5d后首次更换培养液,弃去未贴壁细胞,此后每3～4d换液1次。④密度梯度离心法:Ficoll分离液组选用的Ficoll分离液密度为1.077;Percoll分离液组将Percoll分离液与0.1mol/L磷酸盐缓冲液按9∶1比例混匀,密度为1.073。将两组大鼠骨髓置入离心管,离心弃上清,轻轻叠加到相同体积的各自对应分离液上,再次离心收集界面层白色混浊液,采用F12-DMEM培养液重悬细胞,按1×109L-1的密度接种于培养瓶中,培养条件与贴壁分离法相同。⑤指标检测:倒置显微镜下,每天观察贴壁分离、密度梯度离心不同培养条件下细胞的生长情况和活体形态特征。进行锥虫蓝排斥试验,蓝染细胞为死亡细胞,在3min内用计数板分别计数活细胞和死细胞,未被蓝染细胞所占细胞总数的百分比即为初步得到细胞活性的数据。两种分离方法均取生长良好的第3代细胞,以时间为横坐标,细胞数为纵坐标,绘制生长曲线。结果:18只大鼠均进入结果分析。①细胞形态观察结果:贴壁分离法:采用进口血清培养的两组细胞形态学上都表现为长梭形,细胞活性较高,且给予F12-DMEM培养基的细胞增殖较快,集落融合较早,传代所需时间短;采用国产血清培养的两组细胞中,给予F12-DMEM培养基可以获得梭形细胞,而给予DMEM培养基后则多为类圆形骨髓样细胞,仅见极少梭形细胞。密度梯度离心法:Ficoll分离液组和Percoll分离液组均可培养出梭形骨髓间充质干细胞,细胞活性均高,但集落融合、传代所需的时间均较贴壁分离法长。②细胞活性检测结果:贴壁分离法:进口血清 DMEM组、进口血清 F12-DMEM组、国产血清 DMEM组、国产血清 F12-DMEM组的活细胞率分别为98.3%,98.7%,97.1%,97.7%,组间比较差异无显著性意义(χ2=0.054～0.620,P均>0.05)。密度梯度离心法:Ficoll分离液组活细胞率与Percoll分离液组相似(96.9%,97.1%,t=1.066,P>0.05)。③第3代细胞生长曲线测定结果:不同培养条件下各组第3代细胞生长曲线基本相似,在培养1d时,细胞量稍有减少;4d后细胞数均迅速增长;8d进入平台期,细胞增殖减慢。结论:采用全骨髓贴壁分离法和密度梯度离心法,只要选择合适的培养条件均可获得骨髓间充质干细胞,但选用进口胎牛血清、F12-DMEM培养基效果较好。     

胶原性关节炎大鼠滑膜组织细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化

目的:观察Ⅱ型胶原诱导的实验性关节炎动物模型组织细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化,探讨基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1在类风湿关节炎发病机制中的作用。方法:实验于2005-09/2006-11在白求恩国际和平医院中心实验室完成。①实验分组:健康雄性Wistar大鼠60只,体质量(100±20)g,随机选出50只以备造模,另外10只作为对照组。在造模成功的大鼠中再随机选出10只作为模型组。②实验方法:采用10mg牛Ⅱ型胶原与100mg弗氏不完全佐剂和60mg卡介苗充分研磨后,以每支每点0.1～0.2mL(1g/L)从大鼠背部尾根部多点皮下注射,于10d后按上述方法和剂量再次重复免疫和制作大鼠胶原性关节炎模型。③实验评估:初次免疫后7周,剥离膝关节滑膜,进行苏木精-伊红染色光镜下观察;切除另侧膝关节滑膜,免疫组织化学染色后,用Metamorph图像分析系统进行检测,计算每个视野基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1的阳性面积比,以其作为阳性反应细胞密度。结果:纳入大鼠60只,20只进入结果分析。模型组大鼠关节组织中的基质金属蛋白酶3阳性密度为0.75±0.19,明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01);组织金属蛋白酶抑制剂1的表达阳性密度为0.48±0.17,与对照组0.78±0.21比较明显降低,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化与胶原性关节炎大鼠的发病相关。     

工程化视知觉感知学习系统治疗儿童弱视的效果评价

目的:传统治疗弱视的方法(如遮盖治疗,精细训练等)起效慢,疗效欠佳;视知觉感知学习系统作为一种针对性很强的儿童弱视治疗方法,其疗效需进一步观察。方法:①收集2006-09/2007-02于广西壮族自治区人民医院视光中心就诊的弱视儿童125例250眼,女73例,男52例,年龄(6±2)岁。患儿家长知情同意并签署知情同意书;实验经医院伦理委员会批准。②根据视功能检查结果,采用视知觉感知学习系统对弱视患儿进行针对性的治疗,如双眼视力相差两行以上,辅助遮盖优势眼治疗。1个月为1个疗程,每天训练2次,每次2个训练内容(程序),每个训练内容10min,40min/d,训练内容之间要求有10min左右的休息间隙。训练需在安静和黯淡环境下进行。每月定期复查双眼视力及其各项视功能的恢复情况,并根据复查结果继续原程序治疗或调整治疗程序。结果:弱视患儿125例均进入结果分析。①视力:视知觉感知学习系统治疗儿童弱视的总有效率为75.2%,视力提高行数从治疗第3个月起有大幅增加(P<0.05),最佳矫正视力由治疗前的0.60±0.23提高至治疗后的0.86±0.26,差异有显著性意义(P<0.05)。②治疗时间与疗效:疗效达到进步的平均时间为(2.82±1.30)个月,达到基本治愈为(2.87±1.40)个月。治疗3个月的患者视力疗效达进步率最高[98%(39/40)],治疗1个月的患者视力进步率最低[55%(31/56),P<0.05]。基本治愈率随治疗时间的增加递增,治疗4个月组基本治愈率最高[67%(31/46),P<0.05]。结论:视知觉感知学习系统治疗儿童弱视疗效快,达到有效的时间为治疗两三个月。     

Medical and substance-related comorbidity in bipolar disorder: translational research and treatment opportunities

It is well established that individuals with bipolar disorder are differentially affected by substance-related as well as medical disorders (ie, cardiometabolic disorders, respiratory disorders, neurological disorders, and infectious diseases). Emerging evidence indicates that some comorbid conditions (eg, diabetes mellitus) in bipolar individuals may be subserved by overlapping neurobiological networks. Disturbances in glucocorticoid/insulin signaling and immunoinflammatory effector systems are points of pathophysiological commonality between bipolar disorder and "stress-sensitive" medical disorders. Subphenotyping bipolar disorder as a function of comorbidity and temporality of onset may provide an opportunity for refining disease pathophysiological models and developing innovative disease-modifying therapies.     

Copeptin,a novel prognostic biomarker in ventilator-associated pneumonia

Background  

The present study sought to investigate the correlation of copeptin with the severity of septic status in patients with ventilator-associated pneumonia (VAP), and to analyze the usefulness of copeptin as a predictor of mortality in VAP.     

己糖激酶在原代培养腹膜间皮细胞的表达

目的 :探讨大鼠腹膜间皮细胞 (peritonealmesothelialcell,PMC)的原代培养方法及其己糖激酶 (hexoki nase ,HK)的表达。方法 :胰蛋白酶 EDTA消化法进行PMC的分离、培养 ,6 磷酸葡萄糖脱氢酶 (G6PDH)偶联比色法检测其HK总活性。结果 :PMC的原代及传代细胞 5～ 8d即可达到融合 ,其HK的基础活性为 (4.80± 0 .39)U/g蛋白。结论 :改良的胰蛋白酶消化法是进行PMC原代培养的一种可靠的实验方法。PMC有较强的HK活性 ,参与了腹膜透析时对葡萄糖吸收和利用方面的调节 ,可能对透析超滤有较大的影响